外周血是我們流式實(shí)驗(yàn)中常用到的樣本之一。由于血液離體后會(huì)在凝血因子的作用下凝固(圖1),采集外周血樣本時(shí),需要使用帶抗凝劑的采血管,或采集后立即加入抗凝劑。通常,我們流式實(shí)驗(yàn)中用到的抗凝劑有兩種:EDTA和肝素。
鉀鹽在血液中的溶解性更好,因而使用較多,尤其是二鉀鹽——EDTA-K2可以通過噴霧干燥法附著在采血管的內(nèi)表面,不會(huì)對(duì)采集的血液樣品產(chǎn)生稀釋。
EDTA對(duì)血細(xì)胞形態(tài)的影響比較小,有較好的穩(wěn)定性,但EDTA會(huì)抑制或干擾纖維蛋白凝塊形成時(shí)纖維蛋白單體的聚合,不適于血凝和血小板功能的檢測(cè),也不適用于鈣、鉀、鈉及含氮物質(zhì)的測(cè)定。
肝素螯合力低,對(duì)水分子運(yùn)動(dòng)的影響小,對(duì)血液成分的干擾少,不影響紅細(xì)胞體積,不引起溶血,可謂優(yōu)點(diǎn)眾多。但肝素也有兩個(gè)明顯缺點(diǎn):
● 肝素主要從豬牛羊等動(dòng)物組織中分離得到,相比其他抗凝劑的成本更高; ● 肝素只能延緩凝血過程而不能阻止凝血。實(shí)際使用中發(fā)現(xiàn),使用肝素鈉作為抗凝劑的全血,在常溫10~12小時(shí),會(huì)逐漸出現(xiàn)凝血結(jié)塊的現(xiàn)象。
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